PROGRAMA:

1.    Introducción a la cromatografía
1.1.    Introducción y cronología de la técnica de HPLC.
1.2.    Aspectos teóricos de la separación cromatográfica.
1.3.    Expresiones básicas en cromatografía.

2.    Tipos de HPLC
2.1.    Diferentes mecanismos de separación.
2.2.    Modos de HPLC.
2.3.    Técnicas de HPLC.

3.    Análisis cualitativos y cuantitativos en HPLC
3.1.    Análisis cualitativos en HPLC.
3.2.    Análisis cuantitativos en HPLC.

4.    Instrumentación de HPLC
4.1.    El sistema fluídico: uniones y tuberías.
4.2.    Bombas, sistemas bombeo y de gradientes.
4.3.    Inyectores y autoinyectores.
4.4.    Columnas.
4.5.    Detectores.

5.    Validación y normas GLP en HPLC.

6.    Sesión práctica en el laboratorio
6.1.    Comprobación de los módulos de los cromatógrafos.
6.2.    Manejo de los equipos.
6.3.    Realización de un método con muestras reales.

7.    LCMS
7.1.    Introducción y cronología. Definiciones y términos. Propiedades analíticas de las medidas espectrométricas.
7.2.    Medidas SIM y SCAN.
7.3.    Instrumentación:
•    Interfaces, modos de ionización y aplicabilidad.
•    Tipos de analizadores.
•    Sistemas MS-MS: triple cuadrupolo, trampa iónica y otros.
7.4.    Otras hibridaciones: LC-ICP, LC-RMN, LC-FTIR.

8.    Desarrollo y optimización de métodos de HPLC
8.1.    Selección de la fase estacionaria.
8.2.    Selección de la fase móvil.
8.3.    Preparación y tratamiento previo de las muestras.
8.4.    Mantenimiento preventivo.
8.5.    Solución de problemas comunes (“Troubleshooting”).
8.6.    Algunas aplicaciones características.

9.    Programa de prácticas (50 horas)
9.1.    Desarrollo de métodos mediante simulación informatizada.
9.2.    Cualificación OQ (Operation Qualification):
•    Cualificación del sistema de bombeo.
•    Cualificación del inyector.
•    Cualificación del detector.
9.3.    Test de columna: datos del fabricante vs. datos reales.
9.4.    Análisis de productos alimenticios.
9.5.    Análisis de productos farmacéuticos.
9.6.    Análisis de productos cosméticos.
9.7.    Optimización de métodos con horno de columnas y colector de fracciones.
9.8.    Especificidad con detección Diode Array y Autoinyector.
9.9.    Suitability test.

10.    Introducción a la cromatografía de gases
10.1.    Introducción y cronología de la técnica de GC.
10.2.    Aspectos teóricos de la separación cromatográfica.
10.3.    Expresiones básicas en cromatografía.

11.    Tipos de GC
11.1.    Columnas de GC.
11.2.    Fases estacionarias.
11.3.    Columnas capilares. Tipos y fases estacionarias.
11.4.    Columnas empaquetadas. Tipos y fases estacionarias.
11.5.    Últimos avances en tecnología de columnas.
11.6.    Técnicas emergentes de GC.

12.    Análisis cualitativos y cuantitativos en GC
12.1.    Análisis cualitativos en GC.
12.2.    Análisis cuantitativos en GC.

13.    Instrumentación en GC
13.1.    La línea fluídica y neumática: uniones, tuberías y accesorios.
13.2.    Requerimientos de los gases empleados y medida del flujo.
13.3.    Programación de temperatura y presión durante los análisis.
13.4.    Inyectores de GC. Tipos y propiedades.
13.5.    Detectores de GC. Tipos y propiedades.

14.    Automatización de los análisis. Empleo de válvulas selectoras

15.    Validación y normas GLP en GC

16.    Sesión práctica en el laboratorio
16.1.    Comprobación de sus módulos de los cromatógrafos.
16.2.    Manejo de los equipos.
16.3.    Realización de un método con muestras reales.

17.    GCMS

18.    Introducción y cronología
18.1.    Definiciones y términos.
18.2.    Propiedades analíticas de las medidas espectrométricas
18.3.    Medidas SIM y SCAN.
18.4.    Instrumentación:
•    Interfaces, modos de ionización y aplicabilidad.
•    Tipos de analizadores.
18.5.    Sistemas MS-MS: triple cuadrupolo, trampa iónica y otros.
18.6.    Otras hibridaciones con GC.

19.    Desarrollo de métodos de GC
19.1.    Aspectos prácticos derivados de la teoría
•    Efecto del gas portador.
•    Efecto de la temperatura.
•    Efecto del espesor de la fase estacionaria.
•    Efecto del diámetro interno.
•    Efecto de longitud de columna.
19.2.    Desarrollo de métodos de GC:
•    Selección de columna.
•    Establecimiento de parámetros instrumentales.
19.3.    Simulación informatizada.
19.4.    Problemas comunes y sus soluciones (“Troubleshooting”).
19.5.    Acciones usuales de mantenimiento.
19.6.    Discusión de algunas aplicaciones características.

20.    PRÁCTICAS DE LABORATORIO (50 HORAS)
20.1.    Desarrollo de métodos mediante simulación informatizada.
20.2.    Reconocimiento del equipo y software.
20.3.    Cualificación OQ (Operation Qualification)
•    Cualificación real del sistema de bombeo.
•    Cualificación real del inyector.
•    Cualificación real del detector.
20.4.    Test de columna: datos del fabricante vs. datos reales.
20.5.    Cómo establecer la temperatura óptima y las rampas.
20.6.    Cómo establecer la presión y flujo óptimos mediante las curvas van Deemter.
20.7.    Cómo establecer una relación de split óptima.
20.8.    Cómo establecer un tiempo de splitless óptimo.
20.9.    Linealidad y repetitividad de la inyección.
20.10.    Efectos de memoria (carry over) en el inyector.
20.11.    Optimización y cuantificación de muestras reales.
20.12.    Aplicación del Suitability test.
20.13.    GCMS.